Архалофенатовая кислота ингибирует воспалительную реакцию, вызванную формированием кристаллов моноурата натрия, с помощью активации сигнальной системы AMP-активируемой протеинкиназы

В клинических исследованиях неоднократно было показано, что архалофенат, помимо урикозурической активности, обладает противовоспалительными свойствами. Каков же механизм противовоспалительного действия.

ПРЕДПОСЫЛКИ:

Архалофенатовая кислота — активная кислотная форма архалофената — является неагонистичным лигандом рецептора, активируемого пролифератором пероксисом γ (PPARγ) и обладает урикозурической активностью через ингибирование URAT1. В исследованиях II фазы было показано снижение количества обострений острого подагрического артрита в группе с лечением с помощью архалофената по сравнению с группой, где лечение проводили только аллопуринолом. Таким образом, мы исследовали противовоспалительное действие и его механизмы для архалофената и его активной кислотной формы в отношении кристаллов моноурата натрия (МН).

МЕТОДИКА:

Мы оценили ответы in vivo на кристаллы МН на модели подкожных воздушных мешков на мышах и на мышиных макрофагах, полученных из костного мозга (КММ), с помощью ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA), ДСН-ПААГ/Вестерн блот, иммунохимии и трансмиссонной электронной микроскопии.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Пероральное применение архалофената (250 мг/кг) притупляет общее проникновение лейкоцитов, приток нейтрофилов и снижает уровень интерлейкина (IL)-1β, IL-6 и CXCL1 в ответ на инъекции кристаллов МН (p < 0,05 для каждого). Архалофенатовая кислота (100 мкM) способствует снижению выработки IL-1β, индуцированной кристаллами МН, в КММ с помощью ингибирования активации инфламмасом NLRP3. В дополнение, архалофенатовая кислота дозозависимо повышает активацию (как показано по фосфорилированию) AMP-активируемой протеинкиназы (AMPK).

В исследованиях на нокаутных мышах AMPKα1 мы выявили, что AMPK способствует противовоспалительному действию архалофенатовой кислоты. Более того, архалофенатовая кислота снижает способность кристаллов МН подавлять активность AMPK, регулирует экспрессию множества последующих мишеней AMPK, модулирующих митохондриальные функции и оксидативный стресс, сохраняет интактность митохондриальных крист и объемную плотность и активирует противовоспалительный приток аутофагии в КММ.

ВЫВОДЫ:

Архалофенатовая кислота является противовоспалительным агентом и действует через активацию AMPK и его каскадного сигналинга в макрофагах. По-видимому, этот эффект имеет отношение к снижению обострений подагры.

McWherter C, Choi YJ, Serrano RL, Mahata SK, Terkeltaub R, Liu-Bryan R
Arthritis Res Ther. 2018 Sep 6;20(1):204. doi: 10.1186/s13075−018−1699−4.
PMID: 30189890
PMCID: PMC6127987
DOI: 10.1186/s13075−018−1699−4

eng

Arhalofenate acid inhibits monosodium urate crystal-induced inflammatory responses through activation of AMP-activated protein kinase (AMPK) signaling.

BACKGROUND:

Arhalofenate acid, the active acid form of arhalofenate, is a non-agonist peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) ligand, with uricosuric activity via URAT1 inhibition. Phase II studies revealed decreased acute arthritis flares in arhalofenate-treated gout compared with allopurinol alone. Hence, we investigated the anti-inflammatory effects and mechanisms of arhalofenate and its active acid form for responses to monosodium urate (MSU) crystals.

METHODS:

We assessed in-vivo responses to MSU crystals in murine subcutaneous air pouches and in-vitro responses in murine bone marrow-derived macrophages (BMDMs) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), SDS-PAGE/Western blot, immunostaining, and transmission electron microscopy analyses.

RESULTS:

Oral administration of arhalofenate (250 mg/kg) blunted total leukocyte ingress, neutrophil influx, and air pouch fluid interleukin (IL)-1β, IL-6, and CXCL1 in response to MSU crystal injection (p < 0.05 for each). Arhalofenate acid (100 μM) attenuated MSU crystal-induced IL-1β production in BMDMs via inhibition of NLRP3 inflammasome activation. In addition, arhalofenate acid dose-dependently increased activation (as assessed by phosphorylation) of AMP-activated protein kinase (AMPK).

Studying AMPKα1 knockout mice, we elucidated that AMPK mediated the anti-inflammatory effects of arhalofenate acid. Moreover, arhalofenate acid attenuated the capacity of MSU crystals to suppress AMPK activity, regulated expression of multiple downstream AMPK targets that modulate mitochondrial function and oxidative stress, preserved intact mitochondrial cristae and volume density, and promoted anti-inflammatory autophagy flux in BMDMs.

CONCLUSIONS:

Arhalofenate acid is anti-inflammatory and acts via AMPK activation and its downstream signaling in macrophages. These effects likely contribute to a reduction of gout flares.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *